Comparação Entre Eletroforese em Gel de Agarose e Capilar Automatizada na Detecção de Amplificação das Repetições CAG no Gene HTT

Resumo

A Doença de Huntington é uma doença genética rara, neurodegenerativa, progressiva e fatal. Possui herança autossômica dominante e é ocasionada pelo número de repetições CAG anormais no éxon 1 do gene HTT, localizado em 4p16.3. O teste molecular é de grande importância para confirmação do diagnóstico clínico da DH. A testagem molecular envolve amplificação da região de interesse pela técnica de PCR e posterior análise dos fragmentos gerados (amplicons). Este trabalho visa comparar duas técnicas de análise dos amplicons: a eletroforese em gel de agarose (2,5%) e a capilar automatizada na determinação do número de unidades de repetições CAG do gene HTT. Os resultados da eletroforese em gel de agarose mostram existir uma correlação negativa entre idade de início e repetições CAG (r = -0,63; p < 0,05). Entretanto, os resultados da eletroforese capilar mostram uma mais forte correlação negativa entre idade de início da DH e o número de repetições CAG (r = -0,89; p < 0,0001). A variação de repetições CAG entre as técnicas está entre -23 e +48 repetições CAG. Dos 26 indivíduos investigados, 20 tiveram o mesmo diagnóstico independente da técnica utilizada e 6 teriam diagnóstico diferente dependendo da técnica utilizada. A sensibilidade da eletroforese em gel de agarose em relação à eletroforese capilar foi de 83%. A especificidade foi de 62,5%. Tais resultados indicam que a eletroforese em gel de agarose superestima o número de repetições CAG do gene HTT, sendo um teste de baixa precisão para o diagnóstico da DH.